На сегодняшний день существует несколько основных теорий старения. Известно, что процесс старения организма регулируется внутренними, так называемыми «биологическими или молекулярными часами». Этот процесс напрямую зависит от генетически обусловленного снижения скорости обновления клеток организма. В результате научных исследований было установлено, что стареющие клетки, имеют ограниченную способность к созданию себе подобных. То есть воспроизведение новых клеток с возрастом происходит гораздо медленнее, а разрушение осуществляется быстрее. Постепенное снижение скорости воспроизведения клеток, приводящее, в конечном счете, к ее остановке, называют клеточным или репликативным старением. Это свойство клеток, а именно ограниченность воспроизведения себе подобных клеток была впервые доказана около 50 лет назад (Hayflick L., Moorhead P.S., 1961 ; Hayflick L., 1965). Стареющие клетки имеют неудвоенное количество ДНК, но сохраняют жизнеспособность и метаболическую активность (например, накопление липидов – патогенез атеросклероза и продолжающийся рост клетки) в течение длительного времени. Состояние клеточного старения характеризуется утратой клетками способности синтезировать ДНК (Afshari C.A. et al., 1993). Многие гены, отвечающие за клеточное обновление, остаются способными к действию (экспрессии) с помощью ростовых факторов, сигнальных пептидных молекул.
Известна взаимосвязь старения и микроокружения стволовых клеток. Описан факт возрастного снижения активации пролиферации стволовых клеток, что помимо клеточного обеднения зрелых клеток, способствует старению человеческих тканей. Эти изменения напрямую зависят от свойств клеточного микроокружения, а именно от микроокружения стволовых клеток, в котором с возрастом развивается «дефицит» цитокинов, ростовых факторов, сигнальных, регуляторных молекул.
Мультипотентные стволовые клетки.
Основной функцией стволовых клеток во взрослом организме является физиологическая замена отслуживших свое дифференцированных клеток и восстановление клеточного состава поврежденных в силу тех или иных причин тканей – это «машины регенерации» для поддержания морфофункционального постоянства ткани. Наименее дифференцированные стволовые клетки находятся в организме в состоянии «ареста», им обязательно нужен каскад сигналов для запуска пролиферации. И тогда запускается процесс их поэтапного созревания в определенном направлении (дифференцировки), но при этом, в результате «ассиметричного деления» сохраняется запас стволовых клеток и в неизмененном виде [7-21].
Опубликованы результаты труда ученых из Института Стоуэрса, работающим под руководством доктора Тинга Кси (Ting Xie), ещё раз подтвердившие важность «молодого» микроокружения для пролиферации стволовых клеток. Кси считает, что неэффективное замещение изношенных клеток взрослых тканей из-за снижения пролиферации стволовых клеток – первоочередная причиной старения. А снижение пролиферации стволовых клеток – результат уменьшения синтеза каскада биоактивных молекул. Если мы научимся замедлять процесс старения клеток путем определенных манипуляций над самими клетками или их микроокружением, мы сможем замедлить старение всего организма и прогрессию ассоциированных с возрастом дегенеративных заболеваний. И подобных статей множество [22-24].
Не менее интересна и обратная регуляция. Мультипотентные стволовые клетки, помимо других функций, составляют кроветворное микроокружение лимфоидной и миелоидной ткани. Они продуцируют целый ряд необходимых для функционирования гемопоэтических и иммунных клеток ростовых факторов и цитокинов: интерлейкины — 1, 3, 6, 7, 8, 11, 12, 14, колониестимулирующие факторы, LIF и ряд других [25]. В свою очередь иммунные клетки также вырабатывают ряд стимулирующих и ингибирующих факторов, которые оказывают воздействие на стволовые клетки. Таким образом, казалось бы, возможна обоюдная «корректировка» нарушений микроокружения. Но беда в том, что все клетки вырабатывают только базовый фон биоактивных молекул, недостаточный в стареющей коже, (которая страдает ещё и клеточным обеднением = некому производить биомолекулы) для активации пролиферации стволовых клеток. Именно поэтому возникает необходимость во внесении «внешнего» сигнала для активации пролиферации стволовых клеток.
Теория накопления с возрастом «старых» клеток в организме. Часть клеток, населяющих наш организм, с возрастом перестают делиться и обновляться, “стареют”. Есть научные основания предполагать, что именно такие клетки могут провоцировать развитие опухоли, старческих нейродегенераций, создавать атеросклеротические бляшки, нарушающие кровоснабжение мозга, сердца и других органов. Эти клетки своевременно не погибают и выделяют продукты своей жизнедеятельности. Кроме того, при нарушении кровообращения атеросклеротической бляшкой и развитии ишемии кровоснабжаемой ткани, выделяются оксиданты. Что далее переходит или перекликается со второй, обсуждаемой в этом разделе теорией старения, а именно – теория накопления свободных радикалов, которые повреждают другие клетки и их органеллы. При этом как раз гибнут «молодые» активные, функционирующие клетки. Гибнут преждевременно, что приносит ещё больший вред. Гибнут, потому что свободные радикалы повреждают митохондрии, а конкретно начальный участок дыхательной цепи митохондрий. Это приводит к активации в молодой клетке программы апоптоза или естественной клеточной гибели. Как известно, с возрастом выработка собственных антиоксидантов снижается и естественная система антиоксидантной защиты становится гораздо менее совершенной. При повреждении митохондрий происходит «вход» в клетку ионов Са2+ и «выход» из митохондрии цитохрома С с активизацией каскада каспаз. В результате гибнет большое количество клеток, которые жизнеспособны и функциональны, имеют большой, неистраченный запас клеточных делений и высокую теломеру, которые были далеки от старения. Вместе с ними гибнет от апоптоза и их ближайшее окружение. Апоптоз в переводе с греческого означает “листопад”. Прямо таки от «ужаса» включают программу апоптоза клетки, находящиеся рядом с клеткой поврежденной свободными радикалами и включившей программу апоптоза. Это приводит к клеточному обеднению тканей.
К сожалению, не только преждевременное старение это не благо для человека. Схожие механизмы бездумной клеточной гибели здоровых клеток наблюдаются довольно часто. Далеко не всегда запрограммированная смерть клеток приносит явную пользу. Например, апоптоз клеток головного мозга при болезни Альцгеймера, при механической травме головы, при нарушении кровообращения, особенно это касается инсультов как ишемического, так и, в большей степени геморрагического (может усиливать и без того развивающийся неврологический дефицит), при инфаркте миокарда, инфаркте любого органа.
Конечно апоптоз – это защитная реакция организма, необходимая для «выбраковки» генетически измененных клеток, за избавление от зараженных вирусами клеток. И, конечно же, клетки, поврежденные свободными радикалами, тоже «попадают» под действие процесса апоптоза. Хотя многие из них совершенно здоровые и жизнеспособные. Как известно хороша всегда «золотая середина» или разумный подход. Молодые клетки не должны погибать, а старые, наоборот, не должны накапливаться в организме. Кроме того, свободные радикалы не просто так появляются в организме. Они выполняют важные роли. Главное, чтобы их концентрация оставалась в пределах разумного. Если удастся (что крайне мало вероятно) убрать все свободные радикалы, то кто тогда будет бороться с внедрившимися микроорганизмами, грибами, вирусами и простейшими, не говоря уже о стафилококках и стрептококках, если не перекись водорода, супероксидный радикал и д.р.? Кто будет регулировать просвет микрокапилляров и т.д. По данным научных источников, в основе нечувствительности рецепторов к собственному инсулину при диабете второго типа, лежит недостаток перекиси водорода.
Процесс апоптоза более просто можно представить следующим образом. Клетка, подвергшаяся разрушительному действию свободных радикалов, становится на путь «суицида». Принимая роковое решение, клетка заблаговременно сама готовит себя к погребению: вызывает “ритуальных агентов”, роль которых исполняют макрофаги и/или другие иммунные клетки. Один из липидов внутреннего слоя клеточной мембраны, фосфатидилсерин, переходит во внешний слой. Макрофаги постоянно выделяют особый гликопротеин MFG-E8 (milk fat globule-EGF-factor 8 – фактор роста эпидермальных клеток-8 из жировых глобул молока), который специфически связывается с фосфатидилсерином на поверхности клеток, впадающих в апоптоз. Образующиеся комплексы фосфатидилсерина с MFG-E8 и служат теми метками, по которым узнают будущих самоубийц. При перекисном окислении липидов плазматической мембраны в цитоплазме резко повышается концентрация ионов кальция. Если кальциевые депо клетки не справляются с его утилизацией, открывается митохондриальная пора диаметром 2.6-2.9 нм. Она представляет собой канал, проходящий через обе митохондриальные мембраны и состоящий из трех белков: транслокатора адениновых нуклеотидов, потенциалзависимого анионного канала (порина) и бензодиазепинового рецептора. Когда этот комплекс связывается с Са2+, через мембранную пору могут проходить вещества с небольшой молекулярной массой. Это приводит к падению мембранного потенциала и набуханию матрикса, целостность внешней мембраны нарушается, и из межмембранного пространства в цитоплазму выходят белки апоптоза. Их несколько: фактор, индуцирующий апоптоз (APOptosis-inducing factor – AIF), вторичный митохондриальный активатор каспаз (second mitochondria-derived activator of caspases – Smac) и некоторые прокаспазы. Наряду со специфически апоптозными белками, из митохондрии через открытую пору выходит цитохром С, который в норме служит конечным звеном электрон-транспортной цепи. В цитоплазме этот белок связывается с белком Apaf-1 (APOptotic protease activating factor-1 – активирующий протеазу фактор-1) и формирует апоптосомный комплекс. Он с помощью Smac и еще одного фактора (Omi/HtrA2) активирует прокаспазу-9, та, став каспазой-9, превращает два других профермента в каспазы-3 и -7; а они уже расщепляют структурные белки, приводя к появлению биохимических и морфологических признаков апоптоза. В числе первых можно назвать, в частности, переход фосфатидилсерина в наружный мембранный слой. Цитохром С электростатически и гидрофобно связан с внутренней мембраной митохондрий через фосфолипиды. Электростатически связанный цитохром С может оторваться от фосфолипидов, если изменяется ионная сила, плотность поверхностного заряда или рН, а связанный гидрофобно – за счет окислительной модификации митохондриальных липидов. Последнюю реакцию как раз и вызывают активные формы кислорода, которые неизбежно образуются при любых сильных воздействиях (стрессах), а открывание поры усиливает этот процесс. И так, под действием избытка ионов кальция митохондрия разбухает, через пору из нее выходит цитохром С и два белка – AIF и Smac. Далее запускается каскад каспаз и начинается собственно апоптоз клетки.
По данным литературы:
Важную роль для жизнеспособности клетки играет контроль метаболизма и процессов развития, в значительной степени осуществляемый за счет тиол-дисульфидного обмена. Базовым механизмом центральной роли тиол-опосредованного окислительно- восстановительного (редокс) контроля в клеточном метаболизме является способность тиольных групп обратимо изменять свое редокс-состояние с последующим изменением конформационных, каталитических или регуляторных функций белка. Основу клеточного окислительно-восстановительного гомеостаза, с помощью которого может поддерживаться редокс-состояние тиольных групп белков, составляет отношение восстановленного (GSH) и окисленного (GSSG) глутатиона, присутствующего в большинстве клеток в миллимолярной концентрации. Восстановленный глутатион (GSH) – трипептид, менее подвержен окислению в отличие от Cys, что делает его наиболее подходящим для поддержания внутриклеточного редокс-потенциала. Важное значение GSH в редокс-зависимых процессах определяется его участием в регуляции клеточного редокс-зависимого сигналинга и активности транскрипционных факторов, а также тем фактом, что он является внутриклеточным антиоксидантом, играя роль «ловушки» свободных радикалов, косубстрата в реакциях детоксикации пероксидов, катализируемых глутатионпероксидазой (GPx) и глутатионтрансферазой (GST), и выступает в качестве агента, восстанавливающего окисленный глутаредоксин (Grx), необходимый для восстановления дисульфидов. Сохранение оптимального для клетки соотношения восстановленного глутатиона к окисленному (GSSG) – GSH/GSSG является важным условием для ее жизнеспособности. Снижение уровня GSH ниже показателей нормы может служить индикатором нарушения клеточного редокс-статуса и изменения редокс-зависимой регуляции генов. Нарушение внутриклеточного баланса GSH наблюдается при ряде патологий, включая злокачественные новообразования. Сочетание антиоксидантных свойств и способности активировать транскрипцию генов, в том числе некоторых антиоксидантных ферментов, а также ингибировать редокс-зависимые пути активации апоптоза свидетельствуют о важном вкладе GST и Grx в антиоксидантную защитную систему, что повышает устойчивость клеток к окислительному стрессу. Существенным блоком развитию деструктивного действия окислительного стресса служит GST, обладающая высокой активностью по отношению к продуктам Глутатион, глутатионтрансфераза и глутаредоксин 301 перекисного окисления ДНК и липидов. Дисульфиды и смешанные дисульфиды являются субстратами Grx, который играет важную роль в тиол-дисульфидном обмене, регулируя, в частности, активность транскрипционных факторов и процесс апоптоза. Изоформы GST и Grx имеют большое значение в регуляции клеточного сигналинга путем белок-белковых взаимодействий с ключевыми киназами, контролирующими клеточный ответ на стресс, пролиферацию, развитие апоптоза.
Известно что, воздействие на Ras сигнальный путь регуляторного каскада может вызывать противоположные эффекты в опухолевых и нормальных клетках. Так, ингибиторы фарнезилтрансферазы, обеспечивающей процессирование Ras белка из неактивной цитоплазматической в активную гидрофобную мембраносвязанную форму, вызывают гибель опухолевых, но не нормальных клеток. Процессирование Ras белка и нескольких других членов этого семейства белков внутриклеточной регуляции пролиферации и апоптоза зависит от состояния пула глутатиона в клетке и происходит по концевому трипептиду, начиная с серосодержащего аминокислотного остатка цистеина. Таким образом изменение соотношения внутриклеточного пула окисленного и восстановленного глутатиона позволяет активировать Ras сигнальный путь или каскад.
Теория TOR-центрического условно – программированного старения содержит ряд новых подходов к механизмам старения и радикального продления жизни. Преодоление TOR-зависимого старения позволит удлинить жизнь, а последующие открытия позволят дальше продолжить это удлинение. Воздействие на механизмы регуляции киназы mTOR, взаимосвязь киназы с основными сигнальными каскадами клетки и использование ее как мишени при лечении возраст-ассоциированных заболеваний приведет к значимому сглаживанию и исчезновению синдромов старения, таких как атеросклеротическое повреждение сосудов, приводящее к гипертонической болезни, ишемической болезни; ожирение, нейродегенеративные изменения; диабет.
В экспериментах O.Sugawara и соавт. (1990) показано, что клеточное старение – результат генетической программы, с помощью которой специфические гены ограничивают клеточную пролиферацию. Повреждения ядерной и митохондриальной ДНК соматических клеток (метилирование, точечные мутации) накопление с возрастом таких мутаций в различных органах и тканях является основным фактором, определяющим развитие возрастной патологии.
Список литературы:
1. Скрипкин Ю.К., Лезвинская Е.М. Кожа – орган иммунной системы // Вест.дерматол.и венерол. – 1989. – №10. – с. 14-18.
2. Зимина И.В., Лопухин Ю.М. Кожа как иммунный орган: клеточные элементы и цитокины // Иммунология.– 1994. – №1. – с.8-13.
3. Воскобойников Н.М., Чижик О.П. Неинфекционная иммунизация при термических поражениях // Клин. хирургия. – 1974. – № 5. – с.28.
4. Strunk B., Egger C., Leither J. et al. A Skin Homing Molecule Defines the Langerhans Cell Progenitor in Human Peripheral Blood // J. Exp. Med. – 1997. – Vol. 185. – Р.1131-1136.
5. Bridges M., Christifidou – Solomidou M., Albelda S. Expression and function of endothelial cell alpha v integrin receptors in wound-induced human angiogenesis in human skin / SCID mice chimeras // Am. J. Pathol. – 1997. – Vol. 151. – P.975-983.
6. Хлыстова З.С., Калинина И.И., Хавинсон В.Х. Участие эпидермиса в системе иммуногенеза у человека // Иммунология. – 1994. – №3. – С.25-28.
7. Shamblott M.J.,J. Gaerhart et al.Derivation of pluripotent stem cells from cultured human primordial germ cells; Proc.Natl.Acad.Sci.US; 1998,v.95, P.13726-31
8. Evans, M.J., and M.H. Kaufman Establishment in culture of pluripotent cells from mouse embryos. Nature (Lond.). 1981, v.292: P. 154-156 ;
9. Geiger H., Sick S., Bonifer C. et al; Globin gene expression is reprogrammed in chimeras generated by injecting adult hemopoietic stem cells into mouse blastocyst; Cell, 1998 v.93: P.1055-65
10. Deacon T, Dinsmore J, Costantini LC, Blastula-stage stem cells can differentiate into dopaminergic and serotonergic neurons after transplantation, Exp Neurol 1998 v.149 P. 28-41
11. Bianco P., Robey P. Mesenchymal Stem Cell: clinical applications J. Clin. Invest. 2000,v.105, P.1663-68
12. Boeuf H.,C.Hauss, F.DeGraeve et al.; LIF factor dependent transcriptional activaton of embryonic stem cells; J.Cell Biol.,1997,v.138; P.1207-17
13. Deans RJ, Moseley AB , Mesenchymal stem cells: biology and potential clinical uses. Exp Hematol, 2000, v. 28, P.875-84
14. Hauss R, Lange C, Weissinger EM, Kolb HJ, et al. Evidence of peripheral blood-derived, plastic-adherent CD34(-/low) hematopoietic stem cell clones with mesenchymal stem cell characteristics. Stem Cells, 2000; v.18, P. 252-60
15. Itskovitz-Eldor J, Schuldiner M, Karsenti D et.al. Differentiation of human embryonic stem cells into embryoid bodies compromising the three embryonic germ layers. Mol Med 2000 Feb;6(2):88-95.
16. Kelli D.L., Rizzino A.; DNA Microarray analysis of genes regulated during the differentiation of embryonic stem cells; Mol.Reprod.Devel.,2000, v.56, P.113-23.
17. Krebsbach P.H., Kuznetsov S.A., Bianco P. et al. Bone marrow stromal cells: characterization and clinical application.Crit Rev Oral Biol Med 1999; v.10: P.165-81
18. Lewis R. A stem cell legacy: Leroy Stevens; The Scientists, A Stem Cell Legacy: The Scientist, 2000, v.14:P.19-24.
19. O’Shea K.S. Embryonic Stem Cell Models of Development; Anat.Rec.,1999, v.257, P. 32-41
20. Pittenger, M.F.; Mackay, A. M.; Beck, S. C.; et al., Multilineage potential of Adult Mesenchymal stem cells Science, 1999, v. 284, P. 143-47
21. Robey P.G Stem cells near the century mark J Clin Invest, 2000,v.105, P.1489-1491
22. Lei Pan et al. «Stem Cell Aging Is Controlled Both Intrinsically and Extrinsically in the Drosophila Ovary» опубликована в журнале Cell Stem Cell от 11 октября;
23. «Decline in Self-Renewal Factors Contributes to Aging of the Stem Cell Niche in the Drosophila Testis» опубликовано Cell Stem Cell, Volume 1, Issue 4, 11 October 2007, Pages 470-478, Monica Boyle, Chihunt Wong, Michael Rocha and D. Leanne Jones;
24. «Aging within the Stem Cell Niche» опубликовано
Developmental Cell, Volume 13, Issue 5, 6 November 2007, Pages 603-604 Matthew R. Wallenfang.
25. Haynesworth S., Baber M., Caplan A., 1996; Ballas C., Zeilske S., Gerson S., 2002.
26. Interleukin-6 (IL-6) and low O(2) concentration (1%) synergize to improve the maintenance of hematopoietic stem cells (pre-CFC)….self-renewal of hematopoietic stem cells and inhibits committed progenitors (CFC). Since IL-6 influences both stem cells…LC1) supplemented with IL-3 … J Cell Physiol, July 2007
27. Role of IL-6 in the neural stem cell differentiation….multipotent progenitors called neural stem cells. We have examined the…belonging to the interleukin (IL)-6 family and those classified…activator of … Clin Rev Allergy Immunol, June 2005
28. IL-6 and IL-10 promoter gene polymorphisms of patients and donors of allogeneic sibling hematopoietic stem cell transplants associate with the risk of acute graft-versus-host disease….the promoters of interleukin (IL)-6 (-174 G/C) and…of allogeneic sibling hematopoietic stem cell transplantation. Ninety-three recipients…6 GG (odds … Hum Immunol, June 2005
29. The kinetics of circulating cytokines including IL-6, TNF-alpha, IL-8 and IL-10 following allogeneic hematopoietic stem cell transplantation.Pro-inflammatory (IL-6, TNFalpha and IL-8…patients undergoing allogeneic hematopoietic stem cell transplantation (HSCT). IL-6…transplant peaking at … Bone Marrow Transplant, November 2001
30. Long-term expansion and maintenance of cord blood haematopoietic stem cells using thrombopoietin, Flt3-ligand, interleukin (IL)-6 and IL-11 in a serum-free and stroma-free culture system….favourably with other haematopoietic stem cell (HSCs) sources, its use…cytokine cocktails, including interleukin (IL)-6, IL-11, Flt3-ligand…were … Br J Haematol, February 2001
31. Expansion of human NOD/SCID-repopulating cells by stem cell factor, Flk2/Flt3 ligand, thrombopoietin, IL-6, and soluble IL-6 receptor….expansion of human hematopoietic stem cells capable of repopulating in…and a complex of IL-6 and soluble IL-6…method. Addition of IL-3 to the … J Clin Invest, April 2000
32. Flt 3 ligand, MGDF, Epo and G-CSF enhance ex vivo expansion of hematopoietic cell compartments in the presence of SCF, IL-3 and IL-6….basic cocktail of SCF + IL-3 + IL-6 (S36). CD34+ cells from normal bone marrow…persistence of very primitive stem cells. This suggests that… Bone Marrow Transplant, April 1998
33. [Accelerating hematopoietic recovery in allogeneic bone marrow transplantation mice by co-infusion of marrow stromal cells transduced with dual genes of IL-3/IL-6]…observe whether bone marrow stromal cell line QXMSC1 (H-2(d)) engineered to secrete IL-3 and IL-6 can improved the hematopoiesis in… Zhongguo Shi Yan Xue Ye Xue Za Zhi, October 2002
34. Replating potential of colony-forming units of granulocytes/macrophages (CFU-GM) expanded ex vivo by stem cell factor, interleukin (IL)-3, IL-6, granulocyte colony-stimulating factor, erythropoietin with or without thrombopoietin….systems of hematopoietic progenitor cells (HPC) have been extensively…albumin, 50 ng/ml stem cell factor, 50 ng/ml interleukin-3 (IL-3), 50 ng/ml … Int J Hematol, August 1998
35. Peripheral blood stem cell (PBSC) mobilization with chemotherapy followed by sequential IL-3 and G-CSF administration in extensively pretreated patients….least 2.5 x 10(6) CD34-positive cells per kg bodyweight (BW). These…by sequential subcutaneous administration of IL-3 (5 microg/kg BW) for… Bone Marrow Transplant, December 1997
36. IL-6 precludes the differentiation induced by IL-3 on expansion of CD34+ cells from cord blood….expansion of hematopoietic progenitor cells (HPC) from umbilical cord…with four cytokine combinations: stem cell factor plus thrombopoietin…STF), … Haematologica, April 2003
37. Serum soluble IL-6 receptor levels during the mobilization of stem cells to peripheral blood.Serum soluble interleukin-6 receptors (sIL-6R) have…of peripheral blood (PB) stem cell collections in 16 patients…immunosorbent assay. Expressions of … Leuk Lymphoma, March 2002
38. Establishment of SSEA-1- and Oct-4-expressing rat embryonic stem-like cell lines and effects of cytokines of the IL-6 family on clonal growth….alkaline phosphatase-positive rat embryonic stem-like (RES) cell lines. RES cells were characterized…conditions. Cytokines of the interleukin-6 family …Exp Cell Res, August 2000
39. The role of BMP-6, IL-6, and BMP-4 in mesenchymal stem cell-dependent bone development: effects on osteoblastic differentiation induced by parathyroid hormone and vitamin D(3).Human bone marrow-derived mesenchymal stem cells (MSCs) represent an ideal source…hormone (PTH) and vitamin D(3) in bone formation and … Stem Cells Dev, June 2004
40. Macrophage inflammatory protein-1 alpha (MIP-1 alpha) and leukemia inhibitory factor (LIF) protect the repopulating ability of purified murine hematopoietic stem cells in serum-deprived cultures stimulated with SCF and IL-3.The engraftment potential of murine stem cells (HSC) is greatly reduced when these cells…vitro with stem cell factor and interleukin-3. We have evaluated …Ann Ist Super Sanita, January 1999
41. Cell cycle activation of peripheral blood stem and progenitor cells expanded ex vivo with SCF, FLT-3 ligand, TPO, and IL-3 results in accelerated granulocyte recovery in a baboon model of autologous transplantation but G0/G1 and S/G2/M graft cell content does not correlate with transplantability….a new strategy for hematopoietic stem and progenitor cell transplantation based on cytokine-induced…factor + FLT3-ligand + thrombopoietin + … Stem Cells, January 2001
42. [Long term regulated expansion and committed differentiation of JAK2 gene transfected hematopoietic stem/progenitor cells in vitro]…JAK2 gene modified hematopoietic stem/progenitor cells in vitro. METHODS: A…marrow cells from C57BL/6 mice were transduced by…2) AP20187 alone … Zhonghua Xue Ye Xue Za Zhi, February 2004
43. Expansion of mobilized peripheral blood progenitor cells under defined culture conditions rsing CD34+CD71-CD45- cells as a starting population….expansion of transplantable hematopoietic stem cells. We assessed the expansion…the majority (92%+/-5.6) of primitive long-term…this population … J Hematother Stem Cell Res, August 2003
44. [Preliminary assessment of immune reconstitution after autologous peripheral hematopoietic stem cell transplantation (AHSCT)]…combined with autologous hematopoietic stem cell transplantation (AHSCT) has made…Non-hodgkin Lymphoma (NHL), 3 Hodgkin Lymphoma (HD) and…cases were … Ai Zheng, August 2006
45. gammac gene transfer in the presence of stem cell factor, FLT-3L, interleukin-7 (IL-7), IL-1, and IL-15 cytokines restores T-cell differentiation from gammac(-) X-linked severe combined immunodeficiency hematopoietic progenitor cells in murine fetal thymic organ cultures.culture (FTOC) system in which a combination of cytokines consisting of stem cell factor (SCF), Flt-3L, IL-7, IL-1, and IL-15 is added concomitantly. … Blood, December 1998
46. Macrophage inflammatory protein-1 alpha (MIP-1 alpha) and leukemia inhibitory factor (LIF) protect the repopulating ability of purified murine hematopoietic stem cells in serum-deprived cultures stimulated with SCF and IL-3.The engraftment potential of murine stem cells (HSC) is greatly reduced when these cells…have evaluated if the addition of MIP-1 alpha or LIF to these … Ann Ist Super Sanita, January 1999
47. Cloning of human preprotachykinin-I promoter and the role of cyclic adenosine 5′-monophosphate response elements in its expression by IL-1 and stem cell factor….the role of the two CRE in IL-1alpha and stem cell factor (SCF) stimulation of bone marrow stroma…J Immunol, February 2001
48. [Generation of CD34+/Sca-1+ cells from mouse embryonic stem cells with two-step differentiation in vitro]OBJECTIVE: Embryonic stem cells (ESCs) are derived from totipotent…generation of CD(34)(+)/Sca-1(+) HSC from ESC in vitro…containing VEGF, SCF, … Zhonghua Er Ke Za Zhi, November 2004
49. Which stem cells should be used for transplantation?…ever-increasing demand for human stem cells for transplantation, we initiated in…observed (24.6 vs. 2.1 vs. 0.5 vs. 2…CSF, G-CSF, M-CSF, IL-3, IL-6, …Fetal Diagn Ther, January 2004
50. Cytokine production and hematopoiesis supporting activity of cord blood-derived unrestricted somatic stem cells….blood (CB)-derived unrestricted somatic stem cells (USSC) in comparison to bone…LTC-IC were determined after 1, 2, 3, and 4 weeks…M-CSF, GM-CSF, … Exp Hematol, May 2005
51. [Epidermal growth factor stimulates tissue repair in skin through skin stem cell activation]To explore the possible mechanisms of skin regeneration through the epidermal stem cells stimulated by epidermal growth factor (EGF). METHODS: At 8 … Zhongguo Xiu Fu Chong Jian Wai Ke Za Zhi, January 2002
52. [Epidermal growth factor induce the epithelial stem cell island formation in the regenerated epidermis]OBJECTIVE: To explore the cell reversion and epithelial stem cell distribution in skins from different developed stages and regenerated epidermis treated … Zhonghua Yi Xue Za Zhi, June 2001
53. Fibroblast growth factors as regulators of stem cell self-renewal and aging….years, studies have been aimed at delineating growth factors that will sustain and promote the self-renewal potential of stem cells and support the … Mech Ageing Dev, January 2007
54. [Proliferative effect of basic fibroblast growth factor and epidermal growth factor on muscle derived stem cells]OBJECTIVE: To explore the effect of basic fibroblast growth factor (bFGF) and epidermal growth factor (EGF) on the growth of muscle derived stem cells ( … Zhongguo Xiu Fu Chong Jian Wai Ke Za Zhi, September 2006
55. Deregulation of Flk-1/vascular endothelial growth factor receptor-2 in fibroblast growth factor receptor-1-deficient vascular stem cell development.We have employed embryoid bodies derived from murine embryonal stem cells to study effects on vascular development induced by fibroblast growth factor ( … J Cell Sci, March 2004
56. Cultures of human embryonic stem cells: serum replacement medium or serum-containing media and the effect of basic fibroblast growth factor.Human embryonic stem (hES) cells have traditionally been cultured…serum (FCS) and mouse fibroblasts as feeder cells. The…compared the … Reprod Biomed Online, September 2004
57. The role of exogenous fibroblast growth factor-2 on the reprogramming of primordial germ cells into pluripotent stem cells….or sperm. We have investigated the manner in which primordial germ cells (PGCs) are reprogrammed in vitro to form pluripotent stem cells in response to … Stem Cells, June 2006
58. Autocrine fibroblast growth factor 2 signaling is critical for self-renewal of human multipotent adipose-derived stem cells.Adipose tissue-derived stem cells offer tremendous potential for…with a decrease in fibroblast growth factor 2 (FGF2) expression and…Stem Cells, November 2006
59. Self-renewing and differentiating properties of cortical neural stem cells are selectively regulated by basic fibroblast growth factor (FGF) signaling via specific FGF receptors….from self-renewing neural stem cells (NSCs) remain mostly unclear…the dorsoventral changes in fibroblast growth factor receptor (FGFR) expressions. NSCs…J Neurosci, February 2007
60. Human intestinal fibroblasts prevent apoptosis in human intestinal mast cells by a mechanism independent of stem cell factor, IL-3, IL-4, and nerve growth factor.In rodents, fibroblasts (FBs) mediate stem cell factor (SCF)-dependent growth of mast cells (MCs). In humans, SCF is mandatory for MC differentiation and … J Immunol, January 2004
61. Epidermal stem cells are the source of sweat glands in human fetal skin: evidence of synergetic development of stem cells, sweat glands, growth factors, and matrix metalloproteinases.biological process, and the extent of cellular trafficking between epidermal stem cells and the development of sweat glands is uncertain. Therefore, …Wound Repair Regen, January 2005
62. Expression and potential role of fibroblast growth factor 2 and its receptors in human embryonic stem cells.Although the detection of several components of the fibroblast growth factor (FGF) signaling pathway in human embryonic stem cells (hESCs) has been … Stem Cells, September 2005
63. Basic fibroblast growth factor supports undifferentiated human embryonic stem cell growth without conditioned medium.have shown that prolonged propagation of undifferentiated human embryonic stem cells (hESCs) requires conditioned medium from mouse embryonic feeders ( … Stem Cells, March 2005
64. Epidermal growth factor as a candidate for ex vivo expansion of bone marrow-derived mesenchymal stem cells.Bone marrow mesenchymal stem cells (BMMSCs) are pluripotent cells…to functional differentiation. The epidermal growth factor (EGF) receptor (EGFR) is… Stem Cells, March 2006
65. Epidermal growth factor is a neuronal differentiation factor for retinal stem cells in vitro.Stem cells are a tool for in vitro elucidation of the putative role of factors on cell fate. Herein we analyze the role of epidermal growth factor (EGF) on … Stem Cells, March 2006
66. Cranial bone defect healing is accelerated by mesenchymal stem cells induced by coadministration of bone morphogenetic protein-2 and basic fibroblast growth factor….stem cells (hMSCs) were investigated for induction of their osteogenic lineage upon provision of cytokine cues in vitro and in the cranial defect model …Wound Repair Regen, March 2004
67.
68. Enhanced antileukemic activity of allogeneic peripheral blood progenitor cell transplants following donor treatment with the combination of granulocyte colony-stimulating factor (G-CSF) and stem cell factor (SCF) in a murine transplantation model.Allogeneic peripheral blood progenitor cells (PBPCs) have mostly been mobilized by granulocyte colony-stimulating factor (G-CSF). There is neither clinical … Bone Marrow Transplant, July 2003
69. Mechanism of divergent growth factor effects in mesenchymal stem cell differentiation….the differentiation of human mesenchymal stem cells into bone-forming cells is stimulated by epidermal growth factor (EGF) but not platelet-derived… Science, June 2005
70. The effects of bone morphogenetic protein and basic fibroblast growth factor on cultured mesenchymal stem cells for spine fusion.transverse process fusion was carried out using cultured mesenchymal stem cells with or without bone morphogenetic protein (BMP) and basic … Spine, May 2007
71. Basic fibroblast growth factor activates ERK and induces c-fos in human embryonic stem cell line MizhES1.Human embryonic stem (hES) cells can be maintained in a proliferative undifferentiated state in vitro by growing them on feeder layers of mouse embryonic … Stem Cells Dev, August 2005
72. Requirement for neurogenesis to proceed through the division of neuronal progenitors following differentiation of epidermal growth factor and fibroblast growth factor-2-responsive human neural stem cells.Epidermal growth factor (EGF)- and fibroblast growth factor-2 (FGF-2)-responsive human neural stem cells may provide insight into mechanisms of neural … Stem Cells, January 2004
73. Transforming growth factor (TGF)beta, fibroblast growth factor (FGF) and retinoid signalling pathways promote pancreatic exocrine gene expression in mouse embryonic stem cells….differentiation programmes. Mouse embryonic stem (ES) cells are pluripotent and can…of the hedgehog, transforming growth factor beta, retinoid, and … Biochem J, May 2004
74. Fibroblast growth factor-4 and hepatocyte growth factor induce differentiation of human umbilical cord blood-derived mesenchymal stem cells into hepatocytes.differentiation of human umbilical cord blood (HUCB)-derived mesenchymal stem cells (MSCs) into hepatocytes by induction of fibroblast growth factor-4 ( …World J Gastroenterol, December 2005
75. Growth and differentiation of embryoid bodies derived from human embryonic stem cells: effect of glucose and basic fibroblast growth factor.Differentiation of embryonic stem (ES) cells generally occurs after formation…this, we examined the growth and differentiation of EBs…of … Biol Reprod, December 2005
76. Fibroblast growth factor-1 and -2 preserve long-term repopulating ability of hematopoietic stem cells in serum-free cultures.that extended culture of unfractionated mouse bone marrow (BM) cells, in serum-free medium, supplemented only with fibroblast growth factor ( … Stem Cells, June 2006
77. Effects of myocardial transplantation of marrow mesenchymal stem cells transfected with vascular endothelial growth factor for the improvement of heart function and angiogenesis after myocardial infarction.OBJECTIVE: To establish the transfection method of vascular endothelial growth factor (VEGF) gene into mesenchymal stem cells (MSCs), to investigate the … Cardiology, January 2007
78. Effects of platelet growth factors on human mesenchymal stem cells and human endothelial cells in vitro.study has been to investigate the effects of a enriched platelet derived growth factors on proliferation and migration of human endothelial and … Eur J Med Res, July 2004
79. Migration of bone marrow and cord blood mesenchymal stem cells in vitro is regulated by stromal-derived factor-1-CXCR4 and hepatocyte growth factor-c-met axes and involves matrix metalloproteinases.Human mesenchymal stem cells (MSCs) are increasingly being considered in cell-based therapeutic strategies for regeneration of various organs/tissues. …Stem Cells, May 2006
80. Hepatocyte growth factor plays roles in the induction and autocrine maintenance of bone marrow stromal cell IL-11, SDF-1 alpha, and stem cell factor….by direct interaction between stromal cells and hematopoietic cells, mediated by…study, we demonstrated that hepatocyte growth factor (HGF) is one of … Exp Hematol, October 2004
81. Pretreatment of adult bone marrow mesenchymal stem cells with cardiomyogenic growth factors and repair of the chronically infarcted myocardium.and functional effects of unmodified adult bone marrow mesenchymal stem cells (MSCs) after myocardial infarction (MI) is controversial. We … Am J Physiol Heart Circ Physiol, February 2007
82. Basic fibroblast growth factor support of human embryonic stem cell self-renewal.Human embryonic stem (ES) cells have most commonly been cultured in the presence of basic fibroblast growth factor (FGF2) either on fibroblast feeder … Stem Cells, March 2006
83. Effect of basic fibroblast growth factor on cultured rat neural stem cell in three-dimensional collagen gel.OBJECTIVES: The effect of growth factors on the three-dimensional culture of neural stem cells has not been reported. We studied the effect of basic … Neurol Res, June 2005
